常见问题
答：在制片过程中时，尽可能清理干净叶片表面的杂质，排除气泡。看显微镜时，激发光电压不能打得太高，初始功率设置为设备最大功率的 1-5%（如50mW激光器使用0.5-2.5mW），逐步增加至最低有效信号强度，烟草细胞的轮廓清晰可见，且分布均匀。
有效信号必须严格匹配BiFC复合物重构荧光蛋白的特征波长（如Venus-YFP的激发488nm/发射500-550nm）。信噪比（SNR）≥3（ImageJ定量分析）。与阴性对照（单独VN/VC片段）强度差异＞5倍。有效信号必须呈现符合生物学逻辑的空间分布特征，比如膜蛋白应在细胞边缘形成连续轮廓，核蛋白则与DAPI共定位。真正的互作信号会在多次实验中稳定出现，且强度随时间增强（荧光蛋白正确折叠需要时间），培养24-48小时观察，与荧光蛋白成熟周期相符，若信号在12小时就强烈出现，反而可能是假阳性。无效信号特征：荧光强度随时间骤降（10分钟内＞50%），细胞形态变形（如液泡破裂）。
更多
推荐资讯
-
2025-03-112025年春季促销活动-浦芥生物
-
2025-03-11构建亚细胞定位载体时，目标蛋白连在荧光蛋白的N端更好，还是C端更好？
-
2025-03-11做烟草瞬时转化，是否有现成的本氏烟草苗？
-
2025-03-11是否有现成的野生型拟南芥苗？
