常见问题
答:不同物种或品种的植物细胞在翻译表达基因时,其表达模式和影响因子不同。建议实验时尽可能选用与目的基因来源相近的受体材料进行表达。不同时间点取样拍照,定位位置不同。活体细胞状态下,某些蛋白有信号肽,会移动。部分蛋白在特定条件(如缺氧)下会发生亚细胞定位改变,需查阅文献确认正常定位。GFP等标记物融合位置(N端/C端)可能改变定位结果,需根据蛋白序列调整融合策略。有些预期不符的情况可能是由仪器分辨率限制的,低分辨率仪器可能无法区分相邻亚细胞结构(如内质网与细胞膜);荧光波长与仪器不匹配会导致信号检测偏差,需更换标记物或调整仪器设置。建议优先排查实验操作问题,若仍无法解决则需考虑蛋白自身特性或物种差异。查阅数据库信息或者参考文献,明确靶蛋白的定位情况,设置空白对照。
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